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| 商品重量: | 0克 |
| 包装规格: | 20次 |
| 别名: | GENMED精子顶体形态/获能金霉素（CTC）荧光染色试剂盒 |
| 种属: | 人或者各种动物 |
| 性状: | 液体 |
- 产品简介
- 引用文献
- 实验方案
- 相关产品
产品名称:
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有效期:
主要用途:
GENMED精子顶体形态/获能金霉素（CTC）荧光染色试剂是一种旨在使用金霉素荧光染色技术，分析精子获能状态/顶体状态的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适用于各种动物或人体精子细胞以及冻存精子细胞的获能检测。产品严格无菌，即到即用，操作简便，性能稳定，荧光清晰。
技术背景
在男科学（Andrology）中，精子（spermatozoa）分析提供了精子生成（spermatogenesis）、精子寿命、以及生育能力的基础信息。其中精子的活力（vitality）、运动能力（motility）、授精潜力（fertilizing potential）、膜结构或染色质结构完整性（integrity）、顶体反应（acrosomal reaction）功能的评价是精子分析的重要指标，也是决定人工受孕或体外授精（in vitro fertilization；IVF）的重要参数。精子获能（capacitation）后，会产生生理性改变，包括钙离子浓度变化，蛋白磷酸化，顶体基质和膜重组，从而精子进入女性生殖道，穿入卵子细胞。其中顶体反应，是指当精子接近卵子实施授精时，精子头部前半端的帽状结构顶体，释放出溶解酶，以便精子和卵子的膜融合。获能/顶体反应测试是一项稳定的精子功能参数，可以用于预测受精成功率。因此顶体的结构完整性（intact）是评价的主要标志，也是不育症和避孕药物研究的对象。使用金霉素（chlortetracycline；CTC）荧光染料染色技术，是精子获能状态，以及精子头部顶体状态分析的最常用的方法。通过常用的荧光显微镜（激发波长395nm，散发波长510nm）便可清晰观察到绿色顶体状态（status）。
产品内容
GENMED清理液（Reagent A） 毫升
GENMED染色液（Reagent B） 微升
GENMED固着液（Reagent C） 微升
产品说明书 1份
保存方式
保存在－20℃冰箱里；GENMED染色液（Reagent B）避免光照，有效保证6月
用户自备
1.5毫升离心管：用于样品操作的容器
微型台式离心机：用于样品操作
血细胞计数器：用于细胞计数
载玻片和盖玻片：用于精子细胞爬片
（共聚焦）荧光显微镜：用于观察染色的精子细胞
实验步骤
1． 准备好获能处理的精子细胞
2． 放进微型台式离心机离心5分钟，速度为600g
3． 小心抽去上清液
4． 加入xx毫升GENMED清理液（Reagent A），混匀颗粒群
5． 在血细胞计数器上进行精子细胞计数，并调整到2 X 107精子细胞/毫升（注意：1小时内完成检测）
6． 移取10微升精子细胞到新的1.5毫升离心管
7． 加入xx微升GENMED染色液（Reagent B），混匀
8． 室温下孵育30分钟，避免光照
9． 加上xx微升GENMED固着液（Reagent D），.混匀
10． 即刻移取20微升到洁净的载玻片一端
11． 用盖玻片或另一个载玻片推片
12． 盖上盖玻片或封片液
13． 即刻在（共聚焦）荧光显微镜（400X）下观察并计数（注意：每个视野计数200个精子）
观察绿色荧光—滤波器激发波长395nm，散发波长510nm ――可见绿色荧光，表明精子顶体区域
14． 分析结果
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分类 |
染色结果 |
顶体形态 |
意义 |
|
I |
整个顶体均匀明亮绿色荧光 |
完整顶体（intact/whole acrosome） |
未获能顶体 |
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II |
顶体赤道面均匀明亮绿色荧光， 而20%顶体帽端（cap）无荧光显示 |
完整顶体（intact/whole acrosome） |
获能顶体 |
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III |
只有顶体赤道面呈现绿色荧光；精子头部无或低荧光 |
顶体赤道部分（Equatorial segment） |
反应性顶体 |
注意事项
1． 本产品为20次操作
2． 操作时须戴手套
3． 样品检测前，建议在血细胞计数器上进行精子细胞计数
4． 精子细胞计数时乘上稀释倍数104。标准血细胞计数器（Hemocytometer）的计算方法是：
1毫米方块的细胞计数X 104（稀释倍数）＝实际细胞数/毫升
5． 染色完成后，即刻进行检测分析
6． 用户可以使用激发波长360至400nm，散发波长470至530nm的滤波片
7． 参考图像如下（从左到右为I至III分类）：
8． 本公司提供系列发育生物学相关检测试剂产品
质量标准
1． 本产品经鉴定性能稳定
2． 本产品经鉴定荧光
实验方案
暂无实验方案。
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